維持培養(yǎng)細(xì)胞旺盛生長,必須有恒定而適宜的溫度.不同種類的細(xì)胞對培養(yǎng)溫度要求也不同.人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細(xì)胞的正常代謝會受到影響,甚至死亡.培養(yǎng)細(xì)胞對低溫的耐受力較對高溫強,溫度上升不超過39℃時,細(xì)胞代謝與溫度成正比;人體細(xì)胞在39-40℃1小時,即能受到一定損傷,但仍有可能恢復(fù);在40-41℃1小時,細(xì)胞會普遍受到損傷,僅小半數(shù)有可能恢復(fù);41-42℃1小時,細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷,大部分細(xì)胞死亡,個別細(xì)胞仍有恢復(fù)可能;當(dāng)溫度在43℃以上1小時,細(xì)胞全部死亡.相反,溫度不低于0℃時,對細(xì)胞代謝雖有影響,但并無傷害作用;把細(xì)胞放入25-35℃時,細(xì)胞仍能生存和生長,但速度減慢;放在4℃數(shù)小時后,再回到37℃培養(yǎng),細(xì)胞仍能繼續(xù)生長.細(xì)胞代謝隨溫度降低而減慢.當(dāng)溫度降至冰點以下時,細(xì)胞可因胞質(zhì)結(jié)冰受損而死亡.但是,如果向培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護劑(二甲亞砜或甘油),可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長期保存.

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